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当ELISA实验中的样本值较低挨近试剂盒的灵敏度时，就容易发生样本值低于空白值的现象，特别是在血清和血浆样本的查看。ELISA实验专家对此现象的要素分析有两个方面，一是基质效应、二是实验过错 。
一、基质效应
分析中，基质指的是样本中被分析物以外的组分，基质常常对分析物的分析进程有显着的烦扰，并影响分析成果的准确性，这些影响和烦扰被称为基质效应。
仿照物与被测样本在蛋白丰度、复杂性、pH等要素都会存在差异。当单个样本或少量样本值低于空白值时，可能是过错要素，这时应增加重复，进步操作技术。当许多样本都低于空白值时，应思考基质效应的影响，建立校正曲线予以修改。
ELISA试剂盒在开发进程中，标准品不能选用人或动物血清、血浆作为标准曲线的稀释液，只能选用其仿照物。当样本的基质与其仿照物对比，下降抗原抗体的联络，便产生了样本值低于空白值的现象。构成样本值无法计算出数值，或许数值为负。
如今最常用的去掉基质效应的方法是，经过已知分析物浓度的标准样品，一同尽可能坚持样本中的基质不变，建立一个校正曲线。
二、实验过错
过错分为三类，体系过错、随机过错和过错过错。这三类过错中，体系过错对样本值和空白值之间的差异无影响。
ELISA实验中的样本值低于空白值在过错方面首要来源于随机过错和过错过错。